مقایسۀ کمی و کیفی روشهای CTAB و SDS برای تخلیص DNA از گیاه دارویی ماریتیغال (Silybum marianum L.)
نویسندگان
چکیده مقاله:
زمینه و هدف: معمولاً کیفیت DNA با عوامل مختلفی از جمله: عدم آلودگی ناشی از RNA، پروتئین، لیپید و سایر ساختارهایی که برای آنزیم تک پلیمراز (Taq Polymerase) در واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) و آنزیمهای برشی مزاحم، سنجیده میشود. وجود ترکیبات فنلی و ترکیبات ثانویۀ دیگر، استخراج DNA از بافت برگ گیاه دارویی ماریتیغال (Silybum marianum L.) را جهت استفاده در مطالعات ژنتیکی و بیوتکنولوژی مشکل ساخته است. روش بررسی: در این مطالعه دو روش استخراج DNA جهت استخراج از بافت برگ 11 تودۀ ماریتیغال مورد مقایسه قرار گرفت. روش نخست بر اساس روش SDS انجام شد و در روش دوم از دستورالعمل CTAB با انجام تغییراتی استفاده گردید. کمیت DNA استخراج شده با تعیین میزان جذب هر یک از نمونهها در طول موج های260 و 280 نانومتر بهوسیلۀ دستگاه اسپکتروفتومتر مشخص گردید. در این پژوهش کیفیت DNA از نظر وجود شکستگی و مقدار RNA استخراج شده بهوسیلۀ الکتروفورز با ژل آگارز ارزیابی شد. یافتهها: در میان روشهای بهکار گرفته شده جهت استخراج DNA از بافت برگ جمعیتهای ماریتیغال، روش CTAB از نظر کمیت و کیفیت DNA استخراج شده کارآیی پایینی داشت، در حالیکه روش SDS کارآیی مناسبی از نظر کمیت، کیفیت و خلوص DNA استخراج شده نشان داد. نتیجهگیری: از آنجاییکه نسبت 280A/260A بیش از 2 نشاندهنده وجود RNA و تخریب زیاد DNA و نسبت کمتر از 8/1 نشاندهندۀ وجود آلودگی پروتئینی در DNA است، باید گفت که در مطالعات ژنتیکی و کارهای مهندسی ژنتیک روشی برای تخلیص DNA مناسبتر است که DNA با کیفیت و کمیت بالاتری تولید کند. بسیاری از مطالعات انجام گرفته نشان میدهد که در گیاهان دارویی و گیاهانی که حاوی مواد پلیفنلی و پلیساکارید بالایی هستند بهکارگیری روش تخلیص CTAB و روشهایی که از نظر تکنیکی نزدیک به این روش هستند کارایی مناسبتری نشان میدهند. CTAB به عنوان یک ماده شوینده میتواند با DNA تشکیل کمپلکس دهد و آن را از کربوهیدراتها و پروتئینها جدا نماید. پلیساکاریدهای باقیمانده نیز بهوسیلۀ NaCl غلیظ حذف میگردند.
منابع مشابه
تأثیر کودهای مختلف و تلفیق آنها بر برخی خصوصیات کمّی و کیفی گیاه دارویی ماریتیغال (Silybum marianum L.)
ماریتیغال (Silybum marianum L.) گیاهی است یکساله، از خانواده گل ستارهایها که خاکهای سبک و حاصلخیز را ترجیح میدهد. مهمترین ترکیبی که از دانههای این گیاه استخراج میشود سیلیمارین نام دارد که در درمان امراض کبدی، هپاتیت، سیروز کبدی و پیشگیری از سرطان کبد کاربرد دارد. در سیستمهای کشاورزی متداول هدف استفاده از کودهای مختلف و تلفیق آنها، بدست آوردن بیشترین عملکرد دانه و کیفیت مواد مؤثره است. ...
متن کاملتجزیه ارتباط نشانگرهای مورفولوژیکی، بیوشیمیایی و نشانگرهای مولکولی AFLP در گیاه دارویی ماریتیغال (Silybum marianum L.)
به منظور بررسی رابطه بین نشانگرهای مورفولوژیکی، فیتوشیمیایی و مولکولی در گیاه ماریتیغال (Silybum marianum L.)، 32 اکوتیپ جمعآوری شده از نواحی مختلف کشور به همراه دو رقم خارجی بوداکالازی و CN seeds ارزیابی شدند. تجزیه همبستگی کانونیک بین 8 صفت مورفولوژیکی و 7 ترکیب فلاونولیگنانی تشکیل دهنده سیلیمارین نشان داد که دو متغیر اول کانونیک دارای همبستگی کانونیک قابل توجه و معنیدار بودند. ضرایب همبستگ...
متن کاملتأثیر فصل کاشت و نوع جمعیت بر عملکرد کمّی و کیفی گیاه دارویی ماریتیغال (Silybum marianum L.)
ارزیابی عملکرد کمّی و کیفی جمعیتهای بومی با رقم زراعی گیاه دارویی ماریتیغال تحت تأثیر فصل کاشت پاییز و بهار در منطقه معتدل و اثر کاشت در منطقه سردسیر بر روی ویژگی جمعیتهای مختلف حائز اهمیت میباشد. از اینرو آزمایشی بهصورت کرتهای خردشده شامل فصل کاشت پاییزه و بهاره بهعنوان کرت اصلی و چهار جمعیت بومی (شوش، پلدختر، خرمآباد و الشتر) و یک رقم زراعی بهعنوان کرت فرعی به مدت دو سال (1394-1393) ...
متن کاملتاثیر اقلیم و تراکم بر جمیعتهای مختلف گیاه دارویی ماریتیغال (Silybum marianum L.)
نوع جمیعت، اقلیم و تراکم روی خصوصیات مختلف گیاه دارویی ماریتیغال تأثیر بهسزایی دارند. از اینرو تاثیر دو اقلیم معتدل و سردسیر بر چهار جمیعت بومی جمع آوری شده از شوش، پلدختر، خرمآباد، الشتر و یک رقم زراعی بهصورت طرح بلوکهای کامل تصادفی در چند سال و چند مکان مورد ارزیابی قرار گرفت. همچنین آزمایشی در قالب طرح کرتهای خرد شده شامل سه تراکم 6، 8 و10 بوته در مترمربع به عنوان کرت فرعی و جمیعتهای...
متن کاملبررسی تنوع کاریولوژیکی چند اکوتیپ گیاه دارویی ماریتیغال Silybum marianum L. در ایران
سابقه و هدف: ماریتیغال (L.) S. marianum گیاهی یکساله یا دو ساله است و به راسته Asterales و تیره Asteraceae تعلق دارد. در جنوب و غرب اروپا، جنوب استرالیا، آمریکا ومنطقه مدیترانه پراکنده است. ماریتیغال به عنوان یک گیاه دارویی در درمان بیماریهای کبدی و اختلالات کلیه مورد استفاده قرار می گیرد. بررسی منابع نشان می دهد که تا کنون بررسی های اندکی در مورد سیتوژنتیک این گیاه در جهان بویژه در ایران صو...
متن کاملتأثیر کودهای مختلف و تلفیق آنها بر برخی خصوصیات کمّی و کیفی گیاه دارویی ماریتیغال (silybum marianum l.)
ماریتیغال (silybum marianum l.) گیاهی است یک ساله، از خانواده گل ستاره ای ها که خاک های سبک و حاصلخیز را ترجیح می دهد. مهمترین ترکیبی که از دانه های این گیاه استخراج می شود سیلی مارین نام دارد که در درمان امراض کبدی، هپاتیت، سیروز کبدی و پیشگیری از سرطان کبد کاربرد دارد. در سیستم های کشاورزی متداول هدف استفاده از کودهای مختلف و تلفیق آنها، بدست آوردن بیشترین عملکرد دانه و کیفیت مواد مؤثره است. ...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 15 شماره 3
صفحات 293- 301
تاریخ انتشار 2016-07-22
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023